>b's weblog

One of the steps that limit transfection efficiency in non-viral gene delivery is inefficient nuclear import of plasmid DNA, once it has been delivered into the cytoplasm. Recently, via microinjection into the cytoplasm and in situ hybridizations into a few cell types, it was shown that a region of Simian virus 40(SV40), specifically a c. 372-bp fragment of SV40 genomic DNA encompassing the SV40 promoter-enhancer-origin of replication (SV40 DTS), could enable the nuclear import of a plasmid carrying these sequences (Dean D.A. Exp. Cell Res. 230 (1997) 293). In this report, we address the issue of the suitability of the SV40 DTS for cationic lipid-mediated gene delivery, and its capacity to improve the efficiency of the transfection process. For this study, we used transient reporter gene expression assays on various cell types. The gene expression from the plasmid constructs carrying the SV40 DTS varied with cell type and plasmid construct used. Such cell-type and plasmid-construct dependency on gene expression from plasmids containing the SV40 DTS suggests that the gene expression from plasmids is not entirely dependent on its ability to enhance the nuclear import of said plasmids.

Einer der Schritte, die die Transfektionseffizienz bei der nicht-viralen Genübertragung einschränken, ist der ineffiziente Kernimport von Plasmid-DNA, sobald diese in das Zytoplasma gelangt ist. Kürzlich wurde durch Mikroinjektion in das Zytoplasma und In-situ-Hybridisierung in einigen Zelltypen gezeigt, dass eine Region des Simian-Virus 40 (SV40), insbesondere ein ca. 372-bp-Fragment der genomischen SV40-DNA, das den SV40-Promotor-Enhancer-Ursprung der Replikation (SV40 DTS) umfasst, den Kernimport eines Plasmids, das diese Sequenzen trägt, ermöglichen könnte (Dean D.A. Exp. Cell Res. 230 (1997) 293). In diesem Bericht befassen wir uns mit der Frage, inwieweit sich das SV40 DTS für die durch kationische Lipide vermittelte Genübertragung eignet und ob es die Effizienz des Transfektionsprozesses verbessern kann. Für diese Studie haben wir transiente Reportergenexpressionstests an verschiedenen Zelltypen durchgeführt. Die Genexpression der Plasmidkonstrukte, die das SV40-DTS tragen, variierte je nach Zelltyp und verwendetem Plasmidkonstrukt. Diese Abhängigkeit der Genexpression von Plasmiden, die das SV40-DTS enthalten, von Zelltyp und Plasmid-Konstrukt lässt vermuten, dass die Genexpression von Plasmiden nicht vollständig von ihrer Fähigkeit abhängt, den Kernimport der Plasmide zu verbessern.

Die Studie gibt's hier. (Sicherungskopie)

Na, so ein Zufall. Genau das passiert bei den Plasmid-Verschmutzungen der modRNA-Gentherapien. Die verwenden nämlich SV40-DNA. Also wenn ich nicht genau wüsste, wie gut es die Verbrecher mit den Menschen meinen, könnte man glatt auf den Gedanken kommen, Gen-Transfektion sei beabsichtigt bei der Giftplörre. Aus dem Lexikon:

Als Transfektion wird in der Zellbiologie das Einbringen von Fremd-DNA oder RNA in tierische und teilweise auch andere eukaryotische Zellen bezeichnet.[1] In eukaryotischen Zellen wird im Gegensatz zu ähnlichen Prozessen bei bakteriellen oder auch pflanzlichen Zellen nicht von Transformation gesprochen, da die Transformation in Säugetierzellen die Entartung von Zellen in einen bösartigen Zustand (Tumor, Krebs) beschreibt.